检测频现“假阴性”　专家：高温灭活或致新冠病毒降解

新型冠状病毒肺炎疫情仍未停息，内地有为数不少的病例显示，核酸检测容易出现“假阴性”结果，形同“漏检”。
南京大学模式动物研究所发育生物学与遗传学教授赵庆顺认为，依据有关机构发布的指南，核酸检测前需将采集到的样品进行56℃灭活，这极有可能使新冠病毒核酸被降解，从而导致不能被正常检出，最终提高了假阴性率。

据介绍，2019新型冠状病毒的遗传物质是单链RNA，因此科研人员的目标是在患者身上找到新冠病毒的RNA，这也是临床诊断标准。而目前的临床检测主要采用荧光定量RT-PCR试剂盒检测。该方法是将标本中的特定RNA序列逆转录后进行扩增，经过30次以上扩增后，病毒基因片段达到一定数量即可进行可视检测。

据赵庆顺观察，由北京协和医院和北京市卫健委联合制作的一个网上视频教程显示，在制备核酸模板前，需将采集到的样品在56℃条件下进行30分钟病毒灭活。

此外，中华医学会检验医学分会发布的《2019新型冠状病毒肺炎临床实验室检测的生物安全防护指南（试行第一版）》中也明确写道：核酸扩增前，可以对标本先行消毒。包括56℃孵育30分钟，加蛋白酶K。绝大多数检验医师均按照上述规范，进行56℃条件下时间不等的病毒灭活，然后才制备核酸模板。

但如此操作，病毒RNA极易被核糖核酸酶降解，因为这种酶在60℃时活性最高。核糖核酸酶来自两方面，一是样本细胞内，二是采集、保存、运输过程中的外来污染物。

赵庆顺解释，进行灭活处理是出于生物安全的考虑，保护从事检测的工作人员不被病毒感染。国家卫健委发布的相关文件中，也明确要求对标本进行灭活处理，但对于病毒灭活的具体方法并未做出明确规定。

来自疾控部门、中国医学会检验医学分会、相关医院检验医师的看法是，病毒核酸降解不会对检测结果有太大的影响。而赵庆顺等专家认为，核酸提取前对人体样品进行高温杀毒处理，可能是导致新冠病毒核酸检出假阴性率过高的重要原因之一。

赵庆顺强调，假阴性形同漏检，不仅会导致临床中对疑似患者不能快速确诊，而且会使漏检者成为潜在的病毒传染源。他为此提出建议，一是尽量使用无核糖核酸酶污染的样本采集管，二是将标本放置在可保护病毒核酸免受高温灭活损坏的样品保存液中，从而确保样品RNA从保存、运输到高温灭活等得到全程保护，尽最大可能保证用于临床检测的核酸质量，减少病毒核酸可检出模板在核酸提取前的人为损坏。

（科技日报）